云南農(nóng)大培育出轉(zhuǎn)基因克隆豬

　　在紫外線(xiàn)燈的照射下，轉(zhuǎn)基因克隆豬的腳趾會(huì)發(fā)出綠色熒光。

　　付興華 攝

　　這幾天，云南農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物科學(xué)技術(shù)學(xué)院實(shí)驗(yàn)區(qū)的豬圈熱鬧非凡，原來(lái)，這里剛培育出了10頭轉(zhuǎn)基因克隆豬。

　　這些小豬，在陽(yáng)光下與普通的小豬沒(méi)有什么差別，全身呈灰白色，剛從豬圈里抓出來(lái)時(shí)，還嗷嗷叫喚個(gè)不停。隨后，研究人員將它們放進(jìn)沒(méi)有一點(diǎn)光線(xiàn)的小暗室后，一開(kāi)紫外線(xiàn)燈，卻發(fā)現(xiàn)這些小豬的豬蹄部位竟然散發(fā)出綠色的熒光……

　　解密豬蹄為何會(huì)發(fā)熒光

　　身體里擁有水母的基因

　　主持這個(gè)課題研究的魏紅江教授向晚報(bào)記者介紹，這些小豬就是轉(zhuǎn)基因克隆豬了，它們的基因不全部來(lái)自父母親，一個(gè)或多個(gè)基因是來(lái)自其他生物體。經(jīng)鑒定，共有10頭剛出生的小豬被確定為轉(zhuǎn)基因克隆豬。

　　什么是轉(zhuǎn)基因克隆豬呢?眾所周知，自然界中每個(gè)生物體都固有不同的生命特征，而保持這些生命特征的物質(zhì)就是細(xì)胞核中的基因。生物體的基因一般都來(lái)源于父母。當(dāng)人們把一種生物的基因片段加入到另外一種生物中時(shí)，就誕生了轉(zhuǎn)基因生物，比如在玉米的基因中加入昆蟲(chóng)基因。

　　云南農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物科學(xué)技術(shù)學(xué)院的這項(xiàng)研究，是在學(xué)校和曾養(yǎng)志教授的大力支持下，與該校高士爭(zhēng)教授合作開(kāi)展的，由高教授提供Leptin基因。

　　魏紅江團(tuán)隊(duì)首先從30日齡的豬胎兒皮膚細(xì)胞中分離出成纖維細(xì)胞，進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)，建立細(xì)胞系;

　　第二步，把Leptin基因與水母綠色熒光蛋白基因構(gòu)建到同一個(gè)載體上，通過(guò)轉(zhuǎn)染胎兒成纖維細(xì)胞，獲得陽(yáng)性的供體細(xì)胞;

　　第三步，去屠宰場(chǎng)采集豬卵巢，從卵巢中抽吸出卵母細(xì)胞進(jìn)行體外成熟培養(yǎng)，培養(yǎng)38～42小時(shí)后去除卵母細(xì)胞上的卵丘細(xì)胞，找出已排出第一極體的成熟卵母細(xì)胞，經(jīng)過(guò)去核，并除去第一極體，留下細(xì)胞質(zhì);

　　第四步，把轉(zhuǎn)基因陽(yáng)性細(xì)胞注入到去核的卵母細(xì)胞里，構(gòu)建轉(zhuǎn)基因克隆胚胎;

　　第五步，對(duì)轉(zhuǎn)基因克隆胚胎進(jìn)行細(xì)胞融合和電激活處理，然后移入二氧化碳培養(yǎng)箱內(nèi)進(jìn)行5～24小時(shí)的體外培養(yǎng);

　　第六步，讓代孕母豬發(fā)情，然后把轉(zhuǎn)基因克隆胚胎移植到代孕豬的輸卵管內(nèi)。他們中的極少部分會(huì)進(jìn)一步發(fā)育，在子宮里吸收養(yǎng)分并長(zhǎng)成生命。100多天后，新的生命就會(huì)從這里孕育而出。

　　2011年9月29日至10月8日，研究人員先后把準(zhǔn)備好的轉(zhuǎn)基因克隆胚胎移植到5頭代孕母豬體內(nèi)，平均每頭代孕母豬移植克隆胚胎398枚，有4頭母豬妊娠。

　　為何要培育

　　可建成動(dòng)物模型

　　助人類(lèi)戰(zhàn)勝疾病

　　魏紅江說(shuō)，就拿該校培育的這些轉(zhuǎn)基因克隆豬來(lái)說(shuō)，它們體內(nèi)所含的Leptin蛋白基因，又名瘦素、瘦蛋白抗肥胖因子、苗條素，是由肥胖基因編碼、脂肪細(xì)胞分泌的一種激素樣蛋白質(zhì)，具有調(diào)節(jié)攝食行為、增加能量消耗、抑制脂肪合成、促進(jìn)脂肪分解和降低采食量的作用。

　　這種轉(zhuǎn)基因克隆豬在生長(zhǎng)、繁殖、泌乳和生長(zhǎng)性能方面發(fā)生的改變，將可用于脂肪沉積以及人類(lèi)肥胖病和糖尿病等疾病的研究。

　　該項(xiàng)成果運(yùn)用了分子生物學(xué)、體細(xì)胞轉(zhuǎn)染、體細(xì)胞克隆、胚胎移植等技術(shù)，突破常規(guī)育種所無(wú)法實(shí)現(xiàn)的跨物種基因轉(zhuǎn)移。

　　這項(xiàng)技術(shù)，若與該校的版納微型豬近交系結(jié)合，將在驗(yàn)證基因功能、確認(rèn)關(guān)鍵致命基因、制備生物反應(yīng)器豬，以及建立各種人類(lèi)重大疾病的動(dòng)物模型、開(kāi)展異種器官移植等領(lǐng)域的應(yīng)用都具有非常重要的意義。（楊質(zhì)高）